Please use this identifier to cite or link to this item:
https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/38210Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Νταλάνι, Ερβελίνα | el |
| dc.contributor.author | Dalani, Ervelina | en |
| dc.date.accessioned | 2024-07-18T06:10:36Z | - |
| dc.date.available | 2024-07-18T06:10:36Z | - |
| dc.identifier.uri | https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/38210 | - |
| dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.26268/heal.uoi.17916 | - |
| dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 United States | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/ | * |
| dc.subject | Καρκίνος | el |
| dc.subject | Ογκοπρωτεΐνες | el |
| dc.subject | Θεραπεία του καρκίνου | el |
| dc.subject | Αναστολείς του συμολόκου | el |
| dc.subject | Cancer | en |
| dc.subject | Oncoproteins | en |
| dc.subject | Myc | en |
| dc.subject | Max | en |
| dc.subject | Cancer therapy | en |
| dc.subject | Inhibitors of the complex myc-max | en |
| dc.title | Εγκαθίδρυση in vitro δοκιμασίας σχηματισμού του συμπλόκου MYC-MAX για την ταυτοποίηση νέων αναστολέων της ογκοπρωτεΐνης MYC | el |
| dc.title | Establishment of an in vitro MYC-MAX complex formation assay to identify novel inhibitors of the MYC oncoprotein | en |
| dc.type | masterThesis | en |
| heal.type | masterThesis | el |
| heal.type.en | Master thesis | en |
| heal.type.el | Μεταπτυχιακή εργασία | el |
| heal.classification | Θεραπεία του καρκίνου | el |
| heal.classification | Cancer therapy | en |
| heal.dateAvailable | 2024-07-18T06:11:36Z | - |
| heal.language | el | el |
| heal.access | free | el |
| heal.recordProvider | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας | el |
| heal.publicationDate | 2024-07 | - |
| heal.abstract | Για την ομαλή λειτουργία του οργανισμού μας, κάθε στιγμή, δρουν με συντονισμένο τρόπο σύνθετα δίκτυα πρωτεϊνών που εξασφαλίζουν την σωστή λειτουργία του κυττάρου και κατ’ επέκταση ολόκληρου του οργανισμού. Πολλές φορές λόγω γενετικών αλλαγών η έκφραση αυτών των πρωτεϊνών διαταράσσεται με αποτέλεσμα το κύτταρο να οδηγείται σε μια σειρά γεγονότων που καταλήγει σε δημιουργία κακοηθειών. Δύο μεγάλες ομάδες γονιδίων που παίζουν κρίσιμο ρόλο στην δημιουργία όγκων είναι η οικογένεια των πρώτο-ογκογονιδίων και των ογκοκατασταλτικών γονιδίων. Τα μέλη της πρώτης οικογένειας κωδικοποιούν πρωτεΐνες που εμπλέκονται σε πολύ σημαντικές διαδικασίες για το κύτταρο, όπως για παράδειγμα ο κυτταρικός κύκλος, ο μεταβολισμός, η απόπτωση, η πρωτεϊνοσύνθεση, κ.α. Όταν τα πρώτο-ογκογονίδια υποστούν μια γενετική αλλαγή μετατρέπονται σε ογκογονίδια τα οποία πλέον κωδικοποιούν πρωτεΐνες που συμμετέχουν στην δημιουργία του καρκίνου. Η δεύτερη οικογένεια γονιδίων, τα ογκοκατασταλτικά γονίδια, επιτελούν αντίθετο ρόλο από τα ογκογονίδια, συνεισφέροντας στην καταστολή όγκων. Στις περιπτώσεις που και τα δύο αλληλόμορφα ενός ογκοκατασταλτικού γονιδίου υποστούν μεταλλαγή, τότε το κύτταρο οδηγείται στην δημιουργία του καρκίνου. Στη παρούσα εργασία μελετήθηκε η ογκοπρωτεΐνη MYC, η έκφραση της οποίας ελέγχεται αυστηρά στα φυσιολογικά κύτταρα, αλλά υπερεκφράζεται στους περισσότερους ανθρώπινους καρκίνους, καθιστώντας την ένα από τα πιο σημαντικά ανθρώπινα ογκογονίδια. Έτσι, με την πάροδο των ετών, η αναστολή της οικογένειας γονιδίων MYC ήταν ο στόχος εντατικής έρευνας. Η πρωτεΐνη MYC ρυθμίζει τη μεταγραφή των γονιδίων-στόχων σχηματίζοντας ένα λειτουργικό σύμπλεγμα με την πρωτεΐνη MAX. Η περιοχή του MYC που είναι υπεύθυνη για αυτή την αλληλεπίδραση είναι μια δομή έλικα-στροφή-έλικα (bHLHLZ), καθιστώντας αυτήν την περιοχή του MYC ιδανικό στόχο για την ανάπτυξη νέων αναστολέων του συμπλόκου MYC-MAX. Στη παρούσα μελέτη στόχος μας ήταν να καθιερώσουμε μια in vitro, χωρίς κύτταρα ανάλυση βασισμένη στην αρχή ELISA, χρησιμοποιώντας ανασυνδυασμένς πρωτεΐνες GST-MYC και His-MAX. H ετικέτα (tag), GST, καθιστά δυνατή την πρόσδεση της MYC στα πιάτα καλυμμένα με γλουταθειόνη (glutathione coated plates). Ύστερα από την ακινητοποίηση της, ακολουθεί επώαση με την ΜΑΧ. Το σύμπλοκο που σχηματίζεται είναι δυνατόν να ανιχνευτεί και να ποσοτικοποιηθεί μετά την προσθήκη αντισωμάτων που αναγνωρίζουν την ΜΑΧ και την αντίδραση του OPD με το HRP-συνδεδεμένο δεύτερο αντίσωμα. Η ένταση της απορρόφησης στα 492 nm είναι ενδεικτική της ποσότητας του σχηματισμένου συμπλόκου. Η καθιερωμένη μεθοδολογία υπερισχύει των προηγούμενων μεθόδων καθώς έχει υψηλή αναλογία σήματος προς θόρυβο, υψηλό δυναμικό εύρος και ικανότητα διεκπεραίωσης. Χρησιμοποιώντας αυτή τη δοκιμασία, εξετάζουμε χημικές βιβλιοθήκες με στόχο τον εντοπισμό νέων αναστολέων κατά του συμπλόκου MYC-MAX, οι οποίοι θα μπορούσαν να οδηγήσουν σε νέα αντικαρκινικά φάρμακα που στοχεύουν το πρωτεϊνικό σύμπλοκο MYC-MAX. | el |
| heal.abstract | For the maintenance and smooth functionality of our body, a plethora of protein networks coordinate, at any moment, the correct functioning of the cell and, by extension, of the entire body. Many times, due to genetic changes, the expression of these proteins is disturbed, resulting in the cell being led to a series of events that results in the creation of malignancies. Two large groups of genes that play a critical role in tumorigenesis are the family of proto-oncogenes and tumor suppressor genes. The members of the first family encode proteins that are involved in very important processes for the cell, such as the cell cycle, metabolism, apoptosis, protein synthesis, etc. When proto-oncogenes undergo a genetic change, they become oncogenes which now code for proteins involved in the creation of cancer. The second family of genes, tumor suppressor genes, performs the opposite role of oncogenes, contributing to tumor suppression. If both alleles of a tumor suppressor gene undergo mutation, then the cell is led to the creation of cancer. Expression of the c-MYC protein is tightly controlled in normal cells, but becomes overexpressed in most human cancers, making it one of the most important human oncogenes. Thus, over the years, inhibition of the MYC family has been the goal of intense research. MYC protein regulates transcription of target genes by forming a functional complex with its partner protein MAX. The region of MYC responsible for this interaction lies at the basic helix-loop-helix-leucine zipper(bHLHLZ) domain, making this region of MYC an ideal target for raising new inhibitors of MYC-MAX complex. Here our aim was to establish an in vitro, cell-free assay based on the ELISA principle, using recombinantly expressed GST-MYC and His-MAX proteins. For the complex formation, GST-MYC protein is incubated on glutathione coated 96-well plates and then, 6-His-MAX protein is added. The complex formed is detected and quantified, after the addition of antibodies that recognize MAX and the reaction of OPD with the HRP-linked second antibodies. The intensity of the absorbance at 492 nm is indicative of the quantity of the complex formation. The established assay prevails to previous methods as it has high signal-to-noise ratio, high dynamic range and throughput capacity. Using this assay, we are currently screening chemical libraries aiming in identifying novel inhibitors of MYC-MAX complex, which could lead to new anticancer drugs that target the protein complex MYC-MAX. | en |
| heal.advisorName | Χριστοφοριδής, Σάββας | el |
| heal.committeeMemberName | Χριστοφοριδής, Σάββας | el |
| heal.committeeMemberName | Σύρρου, Μαρίκα | el |
| heal.committeeMemberName | Κούκης, Παναγιώτης | el |
| heal.academicPublisher | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής | el |
| heal.academicPublisherID | uoi | el |
| heal.numberOfPages | 53 | el |
| heal.fullTextAvailability | true | - |
| heal.fullTextAvailability | true | - |
| Appears in Collections: | Διατριβές Μεταπτυχιακής Έρευνας (Masters) - ΙΑΤ | |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| Μ.Ε. Ερβελίνα Νταλάνι (2024)..pdf | 1.33 MB | Adobe PDF | View/Open |
This item is licensed under a Creative Commons License
