Please use this identifier to cite or link to this item:
https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/32276Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Rakovoliou, Elena | en |
| dc.contributor.author | Ρακοβόλιου, Έλενα | el |
| dc.date.accessioned | 2023-01-25T07:48:55Z | - |
| dc.date.available | 2023-01-25T07:48:55Z | - |
| dc.identifier.uri | https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/32276 | - |
| dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.26268/heal.uoi.12088 | - |
| dc.rights | CC0 1.0 Universal | * |
| dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | * |
| dc.rights.uri | http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/ | * |
| dc.subject | Human embryonic stem cellsEctoderm | en |
| dc.subject | Pluripotency | en |
| dc.subject | Differentiation | en |
| dc.subject | Mesoderm | en |
| dc.subject | Endoderm | en |
| dc.subject | Ectoderm | en |
| dc.subject | Ανθρώπινα εμβρυϊκά βλαστικά κύτταρα | el |
| dc.subject | Πολυδυναμία | el |
| dc.subject | Διαφοροποίηση | el |
| dc.subject | Μεσόδερμα | el |
| dc.subject | Ενδόδερμα | el |
| dc.subject | Εκτόδερμα | el |
| dc.title | The role of ARF6 in human embryonic stem cell pluripotency and differentiation | en |
| dc.title | Ο ρόλος της ARF6 στην πολυδυναμία και την διαφοροποίηση των ανθρώπινων εμβρυικών βλαστικών κυττάρων | el |
| dc.type | masterThesis | en |
| dc.type | info:eu-repo/semantics/masterThesis | * |
| heal.type | masterThesis | el |
| heal.type.en | Master thesis | en |
| heal.type.el | Μεταπτυχιακή εργασία | el |
| heal.dateAvailable | 2023-01-25T07:49:56Z | - |
| heal.language | en | el |
| heal.access | free | el |
| heal.recordProvider | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής | el |
| heal.publicationDate | 2022-12-22 | - |
| heal.abstract | ADP-Ribosylation Factor 6 (ARF6) is a low molecular weight GTPase localised to the plasma membrane and endosomal compartments. As ARF6 cycles through its active (GTP-bound) and inactive (GDP-bound) form, it regulates cell surface ligand internalisation, post internalisation trafficking along the endocytic pathway, endosomal recycling and fusion of recycling vesicles with the plasma membrane. Through its regulator proteins, ARF6 affects many cellular functions including receptor signalling, cell motility, adhesion, abscission and lipid homeostasis. ARF6 is indispensable during embryonic development, as Arf6 knock-out leads to a lethal phenotype in mice. We are interested in the membrane receptor trafficking and signalling output of the TGF-β superfamily members (TGF- β, Activin A and BMP4) in the pluripotency and differentiation of human Embryonic Stem Cells (hESCs). The ActivinA/TGF-β family ligands, maintain the pluripotent profile of hESCs, and signal through heteromeric complexes of type I and type II transmembrane serine/threonine kinase receptors which phosphorylate SMAD2/3 proteins. The phosphorylated SMAD2/3 proteins oligomerise with SMAD4, translocate to the nucleus and regulate transcription using a large network of interactions with transcription factors, co-activators and co-repressors. On the other hand, the BMP4 family ligand, which signals through SMAD1/5/8, promotes differentiation of hESCs through a similar mechanism. Previous results from our lab indicate that ARF6 is implicated in Activin A / TGFβ signalling. Using hESCs that over-express ARF6 or CRISPR-KO lines, we addressed the role of ARF6 in the phosphorylation of SMADs upon ligand induction. We found significant alterations in SMAD phosphorylation upon activation or inactivation of ARF6, suggesting that ARF6 is an important factor in the responses of hESCs to Activin A / TGFβ family ligands. Here we extend these studies and address the role of ARF6 in differentiation of the above genome edited hESCs to 3 germ layers, mesoderm, endoderm and ectoderm. Our results are consistent with an effect of ARF6 in the differentiation to all germ layers. KO ARF6 hESCs exhibit enhanced expression of key markers of mesendoderm/ mesoderm (BRACHYURY, MIXL1, WNT3), extra-embryonic endoderm (AFP2, GATA6) and trophoectoderm (CDX2) following induction by BMP4. In the case of ectoderm, PAX6, a marker of neuroectoderm differentiation was enhanced in the absence of ARF6. Finally, markers of endodermal differentiation (SOX17, FOXA2) were reduced by ARF6 KO. We present our findings and discuss their significance. | en |
| heal.abstract | Η ADP-Ribosylation Factor 6 (ARF6) είναι μια GTPάση χαμηλού μοριακού βάρους που εντοπίζεται στην πλασματική μεμβράνη και στα ενδοσωμικά διαμερίσματα. Καθώς η ARF6 εναλλάσσεται μεταξύ της ενεργού (συνδεδεμένης με GTP) και της ανενεργού (συνδεδεμένης με GDP) μορφής της, ρυθμίζει την ενδοκυττάρωση του προσδέτη της κυτταρικής επιφάνειας, την μετά την εσωτερικοποίηση διακίνηση κατά μήκος της ενδοκυτταρικής οδού, την ανακύκληση των ενδοσωμάτων και τη σύντηξη των κυστιδίων ανακύκλησης με την πλασματική μεμβράνη. Μέσω των πρωτεϊνών-τελεστών της, η ARF6 επηρεάζει πολλές κυτταρικές λειτουργίες, συμπεριλαμβανομένης της σηματοδότησης των υποδοχέων, της μετανάστευσης των κυττάρων, της προσκόλλησης, της απόσπασης και της ομοιόστασης των λιπιδίων. Η ARF6 είναι απαραίτητη κατά τη διάρκεια της εμβρυϊκής ανάπτυξης, καθώς η αποσιώπηση της ARF6 οδηγεί σε θανατηφόρο φαινότυπο στα ποντίκια. Μας ενδιαφέρει η διακίνηση των μεμβρανικών υποδοχέων και ο αντίκτυπος της σηματοδότησης των μελών της υπεροικογένειας TGF-β (TGF-β, Activin A και BMP4) στην πολυδυναμία και τη διαφοροποίηση των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων (hESCs). Οι συνδέτες της οικογένειας ActivinA/TGF-β, διατηρούν το προφίλ πολυδυναμίας των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων, και μετάγουν το σήμα μέσω των ετερομερών συμπλεγμάτων των υποδοχέων διαμεμβρανικής κινάσης σερίνης / θρεονίνης τύπου I και τύπου II, οι οποίοι φωσφορυλιώνουν τις πρωτεΐνες SMAD2/3. Οι φωσφορυλιωμένες πρωτεΐνες SMAD2/3 ολιγομερίζονται με τη SMAD4, μετατοπίζονται στον πυρήνα και ρυθμίζουν τη μεταγραφική δραστηριότητα μέσω ενός μεγάλου δικτύου αλληλεπιδράσεων μεταγραφικών παραγόντων, συν-ενεργοποιητών και συν-καταστολέων. Από την άλλη πλευρά, ο προσδέτης της οικογένειας BMP4, ο οποίος επάγει τη σηματοδότηση μέσω των SMAD1/5/8, προωθεί τη διαφοροποίηση των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων μέσω παρόμοιου μηχανισμού. Προηγούμενα αποτελέσματα από το εργαστήριό μας δείχνουν ότι η ARF6 εμπλέκεται στη σηματοδότηση της Ακτιβίνης Α / TGFβ. Χρησιμοποιώντας ανθρώπινα εμβρυϊκά βλαστικά κύτταρα που υπερεκφράζουν την ARF6 ή σειρές CRISPR-KO, εξετάσαμε τον ρόλο της ARF6 στη φωσφορυλίωση των SMADs κατά την επαγωγή του προσδέτη. Βρήκαμε σημαντικές μεταβολές στη φωσφορυλίωση των SMAD κατά την ενεργοποίηση ή την απενεργοποίηση της ARF6, γεγονός που υποδηλώνει ότι η ARF6 αποτελεί βασικό παράγοντα στις αποκρίσεις των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων στους προσδέτες της οικογένειας Ακτιβίνης A / TGFβ. Εδώ διερευνούμε και εξετάζουμε τον ρόλο της ARF6 στη διαφοροποίηση των παραπάνω γονιδιωματικά επεξεργασμένων ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων σε 3 βλαστικά στρώματα, το μεσενδόδερμα, το ενδόδερμα και το νευροεκτόδερμα. Τα αποτελέσματά μας συμφωνούν με την επίδραση της ARF6 στη διαφοροποίηση σε όλα τα βλαστικά στρώματα. Τα ανθρώπινα εμβρυϊκά βλαστικά κύτταρα με ΚΟ της ARF6 παρουσιάζουν ενισχυμένη έκφραση βασικών δεικτών του μεσενδοδέρματος/ μεσοδέρματος (BRACHYURY, MIXL1, WNT3), του εξωεμβρυϊκού ενδοδέρματος (AFP2, GATA6) και τροφοεκτοδέρματος (CDX2) μετά από επαγωγή από BMP4. Επιπλέον, ο PAX6, ένας δείκτης διαφοροποίησης του νευροεκτοδέρματος που επάγεται υπό χημικά καθορισμένες συνθήκες, ενισχύθηκε επίσης απουσία της ARF6. Εν τω μεταξύ, οι δείκτες της ενδοδερμικής διαφοροποίησης (SOX17, FOXA2) που επάγονται από την Ακτιβίνη A μειώθηκαν κατά την απαλοιφή της ARF6 με CRISPR. Παρουσιάζουμε τα ευρήματά μας και συζητάμε τη σημασία τους. | el |
| heal.advisorName | Φώτσης, Θεόδωρος | el |
| heal.committeeMemberName | Φριλίγγος, Ευστάθιος | el |
| heal.committeeMemberName | Παπαμαρκάκη, Θωμαΐς | el |
| heal.committeeMemberName | Γκόγκας, Χρήστος | el |
| heal.committeeMemberName | Murphy, Carol | en |
| heal.academicPublisher | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής | el |
| heal.academicPublisherID | uoi | el |
| heal.numberOfPages | 104 σ. | el |
| heal.fullTextAvailability | true | - |
| Appears in Collections: | Διατριβές Μεταπτυχιακής Έρευνας (Masters) - ΙΑΤ | |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| Μ.Ε. ΡΑΚΟΒΟΛΙΟΥ ΕΛΕΝΑ- The role of ARF6 in hESCs pluripotency and differentiation.pdf | 17.25 MB | Adobe PDF | View/Open |
This item is licensed under a Creative Commons License
