Please use this identifier to cite or link to this item:
https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/27848Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Τασιούλα, Αλεξία | el |
| dc.date.accessioned | 2017-03-07T08:03:39Z | - |
| dc.date.available | 2017-03-07T08:03:39Z | - |
| dc.identifier.uri | https://olympias.lib.uoi.gr/jspui/handle/123456789/27848 | - |
| dc.identifier.uri | http://dx.doi.org/10.26268/heal.uoi.1815 | - |
| dc.rights | Default License | - |
| dc.subject | Μη μικροκυτταρικός καρκίνος πνεύμονα | el |
| dc.subject | NF-κB | el |
| dc.subject | Ετοποσίδιο | el |
| dc.subject | MiRNAs | en |
| dc.subject | Non small cell lung carcinoma | en |
| dc.subject | Etoposide (VP16) | en |
| dc.title | Ο ρόλος των σηματοδοτικών πορειών του NF-κB στις αποκρίσεις καρκινικών κυττάρων στο χημειοθεραπευτικό παράγοντα ετοποσίδιο | el |
| dc.title | The role of NF-κB signaling pathways in cancer cells to chemotherapy drug etoposide | en |
| heal.type | masterThesis | - |
| heal.type.en | Master thesis | en |
| heal.type.el | Μεταπτυχιακή εργασία | el |
| heal.classification | Πνεύμονας -- Καρκίνος | el |
| heal.dateAvailable | 2017-03-07T08:04:39Z | - |
| heal.language | el | - |
| heal.access | free | - |
| heal.recordProvider | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής | el |
| heal.publicationDate | 2017 | - |
| heal.bibliographicCitation | Βιβλιογράφία : σ. 71-82 | el |
| heal.abstract | Ποικιλία εξωκυττάριων αλλά και ενδοκυττάριων ερεθισμάτων θέτουν συχνά σε κίνδυνο την ακεραιότητα του γενετικού υλικού των κυττάρων, αυξάνοντας την πιθανότητα νεοπλασίας. Οι μεταγραφικοί παράγοντες NF-κΒ και Ε2F που απορρυθμίζονται στην καρκινογένεση, ρυθμίζουν διαφορικά και πολλές φορές ανταγωνιστικά, γονίδια-στόχους που εμπλέκονται στην πρόοδο του κυτταρικού κύκλου αλλά και στις αποκρίσεις του κυττάρου σε βλάβες του DNA. Ενώ ο NF-κΒ γενικά προάγει την κυτταρική επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό, οι E2Fs δρουν τόσο ως θετικοί όσο και ως αρνητικοί ρυθμιστές της κυτταρικής επιβίωσης. Ωστόσο, οι μηχανισμοί που οδηγούν στη συντονισμένη δράση αυτών των δύο οικογενειών μεταγραφικών παραγόντων ως απόκριση σε γενοτοξικά ερεθίσματα δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητοί. Στόχος της παρούσας μελέτης ήταν η διερεύνηση του ρόλου των σηματοδοτικών πορειών ενεργοποίησης του NF-κΒ στην έκφραση γονιδίων που ελέγχουν την πρόοδο του κυτταρικού κύκλου και την απόκριση σε βλάβες του DNA, μεταξύ των οποίων και γονιδίων στόχων των E2Fs και miRNAs, ως απόκριση σε γενοτοξικά ερεθίσματα σε ανθρώπινες κυτταρικές σειρές μη-μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC). Για το σκοπό αυτό, κατασκευάστηκαν κυτταρικές σειρές με τη χρήση λεντι-ιικών φορέων που έφεραν shRNA για τις κινάσες ενεργοποίησης του NF-κΒ, ΙΚΚα ή ΙΚΚβ, αλλά και RelA/p65. Αρχικά, καταδείχθηκε ότι ο χημειοθεραπευτικός παράγοντας ετοποσίδιο (VP16) επήγαγε αμφίκλωνες ρήξεις στο DNA που οδήγησαν στη διακοπή της προόδου του κυτταρικού κύκλου, και ιδιαίτερα στη συσσώρευση των ανθρωπίνων καρκινικών κυττάρων πνεύμονα στη φάση G2/M του κυτταρικού κύκλου, διαμέσου της μεταβολής της έκφρασης πρωτεϊνών που εμπλέκονται στη ρύθμιση του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, μεταξύ των οποίων η CcnD1, η Cdc6, οι E2F1-6, η p53 και οι p21Cip1 και p27kip1. Επίσης καταδείχθηκε ότι το ετοποσίδιο επαύξησε τη μεταγραφική ενεργότητα της κανονικής πορείας του NF-κΒ στα ανθρώπινα καρκινικά κύτταρα πνεύμονα με την ακόλουθη σειρά που εξαρτάται από το βαθμό ενεργοποίησης: H1437 > H1792 > H1299 ≥ A549. Στα κύτταρα Α549 και H1299 η ενεργοποίηση του NF-κΒ ήταν μικρότερη, πιθανά λόγω της ιδιοστατικής έκφρασης/ενεργότητας του NF-κΒ στα συγκεκριμένα κύτταρα. Επιπλέον, καταδείξαμε ότι η μειορρύθμιση της κινάσης ΙΚΚα επιβράδυνε την πρόοδο του κυτταρικού κύκλου όλων των καρκινικών σειρών, πιθανά διαμέσου της μεταβολής της έκφρασης γονιδίων-στόχων των μεταγραφικών παραγόντων E2F. Σε αντίθεση η κανονική σηματοδοτική πορεία ΙΚΚβ-RelA/p65 επιβράδυνε την πρόοδο του κυτταρικού κύκλου όλων των καρκινικών σειρών, πιθανά διαμέσου της μεταβολής της έκφρασης συγκεκριμένων NF-κB ρυθμιζόμενων miRNAs, όπως miR-32 και miR-582-5p. Επιπλέον, η κανονική σηματοδοτική πορεία ΙΚΚβ-RelA/p65 ρυθμίζει την έκφραση μιας σειράς miRNAs, και ιδιαίτερα των miR-342-3p και miR-378i κάτω από συνθήκες πρόκλησης βλαβών στο DNA. Η παρούσα μεταπτυχιακή διατριβή κατέδειξε την ύπαρξη ενός ρυθμιστικού δικτύου NF-κB-miRNA που εμπλέκεται στη ρύθμιση του πολλαπλασιασμού και στις αποκρίσεις σε βλάβες στο DNA ανθρωπίνων καρκινικών κυττάρων πνεύμονα. | el |
| heal.abstract | Genomic integrity is challenged by DNA damage from both endogenous and environmental sources, raising the possibility for cancer development. The NF-κB and E2F families of transcription factors that are often subject to deregulation in cancer, differentially control gene expression of target genes that are involved in cell cycle progression and regulation of the DNA damage responses. While NF-κBs generally promote cell proliferation and survival, E2Fs can act as either transcriptional activators or suppressors of cell growth; yet the mechanisms allowing for concerted actions of NF-κBs and E2Fs in response to genotoxic stimuli in cancer cells remain poorly understood. Here, we aimed to investigate the role of NF-κB signaling pathways on the regulation of genes controlling cell cycle progression and DNA damage responses, including E2Fs target genes and miRNAs, in response to genotoxic stimuli in human epithelial lung cancer cells. To this end we constructed stable human lung cancer cell lines bearing shRNAs to either ΙΚΚα or ΙΚΚβ and also RelA/p65. First, we showed that treatment of non small cell lung cancer (NSCLC) cells with etoposide (VP16) resulted in DNA double strand breaks leading to G2/M cell cycle phase, of all cancer cells, irrespective of their p53 status. This was due to the changes in the expression of proteins involved in cell cycle progression, including CcnD1, Cdc6, E2F1-6, p53, p21Cip1 and p27kip1. Next, we analyzed the NF-κΒ transcriptional activity and showed that all cancer cells treated with VP16 increased the canonical NF-κB transcriptional activity, to different extent such as H1437 > H1792 > H1299 ≥ A549. The activation of NF-κB in A549 and H1299 was less profound probably because of the constitutive expression/activity of NF-κB in these cell types. Finally, we showed that down regulation of IKKα slowed down cell cycle progression of all cancer cell lines. That probably happened because of the expression of transcription factors E2F target genes. In contrast, the down-regulation of the canonical ΙΚΚβ-RelA/p65 signaling pathway activity reduced the proliferation of all human lung cancer cell lines, most likely because of the expression of specific NF-κB-regulated miRNAs, such as miR-32 and miR-582-5p, both of which were shown to inhibit lung cancer cell proliferation and tumor growth. Moreover, the canonical signaling pathway ΙΚΚβ-RelA/p65 regulates the expression of miRNAs in response to DNA damage, and in particular the expression of miR-342-3p and miR-378i. Hence, we identified canonical NF-κB-regulated miRNAs under both normal conditions and under conditions of chemotherapy induced DNA damage, pointing towards, the operation of a NF-κB-miRNA regulatory network involved in the control of human lung cancer cell proliferation and DNA damage responses in response to chemotherapy. | en |
| heal.advisorName | Κωλέττας, Ευάγγελος | el |
| heal.committeeMemberName | Φριλίγγος, Ευστάθιος | el |
| heal.committeeMemberName | Χριστοφορίδης, Σάββας | el |
| heal.committeeMemberName | Τζαβάρας, Θεώδορος | el |
| heal.committeeMemberName | Κούκλης, Παναγιώτης | el |
| heal.committeeMemberName | Κωλέττας, Ευάγγελος | el |
| heal.academicPublisher | Πανεπιστήμιο Ιωαννίνων. Σχολή Επιστημών Υγείας. Τμήμα Ιατρικής | el |
| heal.academicPublisherID | uoi | - |
| heal.numberOfPages | 82 σ. | - |
| heal.fullTextAvailability | true | - |
| Appears in Collections: | Διατριβές Μεταπτυχιακής Έρευνας (Masters) - ΙΑΤ | |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| Μ.Ε. ΤΑΣΙΟΥΛΑ ΑΛΕΞΙΑ 2017.pdf | 2.63 MB | Adobe PDF | View/Open |
This item is licensed under a Creative Commons License
